暗視野顯微鏡的原理和使用方法

暗視野顯微鏡(dark field microscope)的聚光鏡中央有擋光片，使照明光線不直接進人物鏡，只允許被標本反射和衍射的光線進入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。暗視野顯微鏡的原理和使用方法：

1、原理：暗視野顯微鏡是利用丁達爾(Tyndall)光學效應的原理，在普通光學顯微鏡的結構基礎上改造而成的。暗視野聚光器，使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光改變途徑，傾斜地照射在觀察的標本上，標本遇光發生反射或散射，散射的光線投入物鏡內，因而整個視野是黑暗的。

2、適用范圍：暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因為具有和周圍環境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對比。這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，只能看到物體的存在、運動和表面特征，不能辨清物體的細微結構。

3、使用方法

(1)把暗視野聚光器裝在顯微鏡的聚光器支架上。

(2)選用強的光源，但又要防止直射光線進入物鏡，所以一般用顯微鏡燈照明。

(3)在聚光器和標本片之間要加一滴香柏油，目的是不使照明光線于聚光鏡上面進行全反射，達不到被檢物體，而得不到暗視野照明。

(4)升降集光器，將集光鏡的焦點對準被檢物體，即以圓錐光束的頂點照射被檢物。如果聚光器能水平移動并附有中心調節裝置，則應首先進行中心調節，使聚光器的光軸與顯微鏡的光軸嚴格位于一直線上。

(5)選用與聚光器相應的物鏡，調節焦距，找到所需觀察的物像。